PCR實驗室工程是生物安全實驗室的一種,是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)和重要手段,主要用于基因突變、基因重組、分子流行病學(xué)、動物遺傳育種等領(lǐng)域。其主要特點是操作環(huán)境嚴(yán)格,實驗材料必須經(jīng)嚴(yán)格消毒處理。它可以在很短時間內(nèi)得到大量的 DNA分子,并可在體外擴(kuò)增,具有快速、高效等特點,因而在科研和臨床診斷上得到廣泛應(yīng)用。
PCR實驗室工程通常分為三部分:實驗室、儀器設(shè)備和實驗材料。PCR實驗室工程一般包括四大部分:實驗區(qū)域、試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)和 PCR擴(kuò)增區(qū)。其中實驗區(qū)域主要包括試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū);試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)主要包括試劑儲存區(qū)和試劑配制室;樣品制備區(qū)主要包括標(biāo)本制備間;擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)包括 PCR擴(kuò)增間、反應(yīng)緩沖液配制間及反應(yīng)產(chǎn)物分析間。在整個實驗室工程中,儀器設(shè)備是為實現(xiàn)實驗?zāi)康姆?wù)的,因此實驗室的設(shè)備一般比較重要,其質(zhì)量和數(shù)量直接影響到實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
功能定位
PCR實驗室工程的功能定位,一般分為四個方面:
1、核酸檢測,即核酸的提取、純化、擴(kuò)增檢測等;
2、基因治療,即基因工程及相關(guān)藥物的研究與開發(fā);
3、分子流行病學(xué),即對人群進(jìn)行基因定位分析研究;
4、生物安全,即對生物進(jìn)行安全防護(hù)研究。對于不同的功能定位,對實驗室工程提出了不同的要求。
建筑設(shè)計
1.布局合理,功能齊全,操作方便。實驗室必須與外界有良好的聯(lián)系,應(yīng)采取措施防止外界污染。建筑結(jié)構(gòu)應(yīng)易于清潔、消毒和維修,室內(nèi)環(huán)境應(yīng)易于清潔。
2.實驗室內(nèi)應(yīng)有足夠的空間進(jìn)行實驗操作,并盡可能減少操作過程中的干擾。
3.實驗室內(nèi)應(yīng)設(shè)有人員入口、污物入口,并有必要的通風(fēng)措施。實驗室應(yīng)有適當(dāng)?shù)恼彰?、空調(diào)和通風(fēng)系統(tǒng)。
4.實驗室內(nèi)應(yīng)設(shè)有適當(dāng)?shù)膽?yīng)急照明,緊急出口應(yīng)明顯可見。實驗室內(nèi)應(yīng)有足夠的空間進(jìn)行實驗操作,并應(yīng)根據(jù)實驗要求設(shè)置相應(yīng)的通風(fēng)系統(tǒng)和機(jī)械排風(fēng)系統(tǒng),以保證實驗室內(nèi)的安全和工作環(huán)境。
實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)主要為實驗室內(nèi)提供恒定的溫度、濕度,保持室內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定,以滿足實驗過程中所需要的空氣質(zhì)量。根據(jù)實驗要求和使用性質(zhì),實驗室內(nèi)往往需要多個相對獨立的區(qū)域進(jìn)行實驗。因此,除了需要保證各個區(qū)域獨立控制外,還需要做到每個區(qū)域內(nèi)都要保證有良好的通風(fēng)換氣效果。實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)的設(shè)計和安裝是一個系統(tǒng)工程,需綜合考慮各種因素,如實驗室面積、溫濕度要求、設(shè)備選型等。
凈化系統(tǒng)
PCR實驗室工程中的凈化系統(tǒng)主要是為了保證 PCR擴(kuò)增過程中所使用的 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物及其他生物樣品具有較高的純度和穩(wěn)定性。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物和其他生物樣品一般采用高壓蒸汽滅菌的方法進(jìn)行處理,然后經(jīng)過洗滌、分裝、儲存、運(yùn)輸?shù)冗^程,整個過程都要經(jīng)過嚴(yán)格的凈化處理。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物及其他生物樣品的洗滌、分裝和儲存,均應(yīng)在生物安全三級實驗室進(jìn)行,實驗室內(nèi)部空氣應(yīng)經(jīng)嚴(yán)格消毒,并達(dá)到國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。
裝修設(shè)計
1.地面采用耐腐蝕、不吸水、易消毒的地面材料。
2.墻面采用防滲漏的耐腐蝕的材料。
5.實驗臺面采用耐腐蝕材料,一般為人造石。
7.實驗室內(nèi)必須設(shè)置吸油煙機(jī),保證室內(nèi)空氣的清潔和安全。
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